RT—PCR实验原理及步骤

RT—PCR的主要步骤

RT—PCR的主要步骤：首先提取样本RNA，通过逆转录酶合成互补DNA（cDNA）。随后将cDNA、特异性引物、荧光探针与热稳定DNA聚合酶混合，进行实时PCR扩增。反应中荧光信号随产物累积而增强，仪器实时监测并绘制扩增曲线，最终通过阈值循环数（Ct值）定量分析初始模板浓度。该技术广泛用于基因表达分析与病原体检测。